從藥物開(kāi)發(fā)、再生醫學(xué)和即時(shí)診斷,到生物傳感器開(kāi)發(fā)和免疫或癌癥的生物學(xué)研究,基于活細胞的檢測方法在各種應用中都極具價(jià)值。自2013年發(fā)表第一項研究以來(lái),MP-SPR技術(shù)已成為研究活細胞的一種有價(jià)值的工具,可以替代熒光顯微鏡或流式細胞術(shù)等傳統方法。雖然使用傳統SPR儀器進(jìn)行的細胞研究很少,但在最近的一些研究中,MP-SPR能夠闡明納米顆粒攝取動(dòng)力學(xué)、藥物吸收途徑和GPCR激活譜。
MP-SPR是市場(chǎng)上少有的允許活細胞的生物學(xué)相關(guān)反應,同時(shí)保持這些活模型的復雜性的實(shí)時(shí)技術(shù)。使用MP-SPR,根據研究需要,活細胞測定可采用以下兩種主要方法:
1、在傳感器表面生長(cháng)細胞
使用標準細胞培養方案在傳感器表面培養細胞,樣品分析物(納米顆粒,藥物化合物)被引入到流程中,對分析物的實(shí)時(shí)細胞反應進(jìn)行評估,并闡明細胞激活或細胞攝取概況。這種方法有助于研究:
a、給定藥物化合物的吸附路線(xiàn)
b、藥物遞送的最佳納米顆粒
c、活細胞樣品最大有效濃度(EC50)的一半
d、納米顆?;虿《具M(jìn)入細胞的方式
MP-SPR技術(shù)已經(jīng)成功地進(jìn)行了基于細胞的分析,分析物范圍從小分子藥物化合物、激素和蛋白質(zhì),到無(wú)機納米顆粒、脂質(zhì)體和細胞外囊泡。
2、在傳感器表面注入活細胞
活細胞被引入流過(guò)傳感器表面的液體(細胞介質(zhì))中,表面用給定的表面涂層(如脂質(zhì)膜)或表面配體(受體)修飾。該方法適用于結合/粘附研究,并提供以下信息:
a、細胞對表面受體(如肽)的親和力
b、細胞附著(zhù)涂層的動(dòng)力學(xué)特征
c、結合細胞與表面的分離
d、給定細胞群的表面特異性
e、表面的最佳防污或抗菌性能
MP-SPR技術(shù)已經(jīng)在細胞和細菌中進(jìn)行了探索,使用不同的涂層,如羥基磷灰石、脂質(zhì)膜、聚合物,并使用各種配體(如肽、抗體和蛋白質(zhì)復合物)進(jìn)行功能化。
3、MP-SPR面對活細胞的其他優(yōu)勢:
a、適用于多種活細胞
b、無(wú)標簽的實(shí)時(shí)結合/粘附研究
c、擴展數據集從細胞響應在樣本加載
d、靈活選擇細胞兼容的表面
e、測量期間保持的生理相關(guān)條件
f、MP-SPR與電化學(xué)和熒光的結合